Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
CD151 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401969
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CD151 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CD151, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CD151 Anticuerpo (H-8): sc-271216
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CD151 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401969 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
CD151 (tetraspanina-24) es una tetraspanina de cuatro dominios transmembrana que organiza microdominios enriquecidos en tetraspaninas y actúa como andamiaje de complejos de adhesión y señalización en la membrana plasmática. Al asociarse con integrinas que se unen a laminina, como ITGA3/ITGB1 e ITGA6/ITGB4, CD151 regula la adhesión célula–matriz, el extendido y la motilidad celulares, y modula la señalización aguas abajo mediante vías de adhesiones focales y remodelación del citoesqueleto. CD151 también influye en el tráfico de membrana y en la biología de los exosomas, moldeando la distribución de receptores y la propagación de señales. La expresión o función desregulada de CD151 se ha asociado con alteraciones de la integridad epitelial y fenotipos invasivos en biología del cáncer, así como con fisiopatología renal y vascular, lo que lo convierte en una diana útil para estudios mecanísticos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CD151 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CD151 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CD151 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CD151 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CD151.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CD151 para la investigación de la señalización de CD151, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CD151 críticos para la función de CD151
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CD151 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CD151 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CD151 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CD151. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CD151 (h) y el plásmido HDR CD151 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CD151 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CD151 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.