CD137 Lentiviral Activation Particles (m): sc-423447-LAC

Mouse Tnfrsf9 kodiert CD137 (4-1BB), ein induzierbares kostimulatorisches Molekül der TNF-Rezeptor-Superfamilie, das auf aktivierten T-Zellen, NK-Zellen und weiteren Immunzell-Subsets exprimiert wird. Die Bindung/Aktivierung von CD137 fördert Zellüberleben, Proliferation und Effektorfunktion durch Rekrutierung von Adaptoren sowie nachgeschaltete NF-κB- und MAPK-Signalwege und unterstützt damit eine anhaltende Immunaktivierung. In Mausmodellen beeinflusst die CD137-Aktivität die T‑Zell-Priming-Phase, die Bildung von Gedächtniszellen und entzündliche Zytokinprogramme, die die Immunhomöostase prägen. Eine fehlregulierte CD137-Signalgebung wurde im Kontext chronischer Entzündung, Autoimmunität, Infektionen und Tumorimmunologie als Regulator der Schwellenwerte für Immunaktivierung untersucht.

CD137 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Tnfrsf9-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CD137 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Tnfrsf9-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CD137-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Tnfrsf9-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.