Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide Double Nickase (h) CCK-BR: sc-401867-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CCK-BR correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CCK-BR Double Nickase (h) et le plasmide CCK-BR Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CCKBR. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CCK-BR Antibody (E-3): sc-166690
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CCK-BR | sc-401867-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CCK-BR | sc-401867-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCKBR code pour le récepteur humain de la cholécystokinine B (CCK-BR), un GPCR de classe A qui se lie à la gastrine et à la cholécystokinine afin de réguler la physiologie gastro-intestinale et la signalisation neuroendocrine. La liaison du ligand active des voies couplées aux protéines G, notamment la mobilisation du Ca2+ via PLCβ/IP3 et les cascades MAPK/ERK, influençant la sécrétion, la contractilité du muscle lisse et les programmes de prolifération cellulaire. La signalisation de CCKBR s’interface avec des réseaux plus larges de seconds messagers qui modulent les réponses transcriptionnelles ainsi que la désensibilisation et la dynamique d’internalisation du récepteur. Une expression ou une signalisation dérégulée a été étudiée dans le contexte de troubles gastro-intestinaux et neuroendocriniens, ainsi que dans des modèles en oncologie où les axes gastrine/CCK peuvent façonner des phénotypes associés aux tumeurs.
CCK-BR Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CCKBR dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CCKBR. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CCKBR. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CCKBR.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.