Plasmide Double Nickase (h) CCDC155: sc-410329-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CCDC155 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CCDC155 Double Nickase (h) et le plasmide CCDC155 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CCDC155. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CCDC155 | sc-410329-NIC | 20 µg | $410.00 |
CCDC155 code une protéine contenant un domaine en coiled-coil, dont on prévoit qu’elle joue un rôle d’échafaudage en favorisant les interactions protéine–protéine et l’organisation spatiale de complexes intracellulaires. Les protéines en coiled-coil participent fréquemment à la dynamique du cytosquelette, au trafic vésiculaire, à des processus associés au centrosome et à l’architecture nucléaire, ce qui relie CCDC155 à des mécanismes fondamentaux coordonnant la structure cellulaire et la signalisation. Bien que CCDC155 reste relativement peu caractérisée, la perturbation d’échafaudages coiled-coil peut influencer la stabilité du génome, la progression du cycle cellulaire et les voies de réponse au stress, fréquemment altérées dans les maladies humaines. Par conséquent, CCDC155 suscite un intérêt pour disséquer des réseaux de régulation dépendants du contexte en biologie cellulaire et pour cartographier les relations génotype–phénotype dans des systèmes modèles.
CCDC155 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CCDC155 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CCDC155. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CCDC155. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CCDC155.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.