Plasmide Double Nickase (h) CCDC125: sc-415026-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CCDC125 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CCDC125 Double Nickase (h) et le plasmide CCDC125 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CCDC125. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CCDC125 | sc-415026-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CCDC125 | sc-415026-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCDC125 code une protéine contenant un domaine en hélice enroulée (coiled-coil), supposée agir comme échafaudage d’interactions protéine–protéine, en soutenant l’organisation de complexes intracellulaires et la régulation spatiale de la signalisation. Les protéines coiled-coil contribuent fréquemment à l’architecture du cytosquelette, au transport vésiculaire et à la coordination des voies du cycle cellulaire et de réponse au stress, bien que les partenaires moléculaires spécifiques de CCDC125 restent imparfaitement définis. Une expression altérée ou une connectivité de réseau dérégulée de ces échafaudages coiled-coil est souvent associée à des défauts de maintenance du génome, de progression mitotique et d’homéostasie cellulaire. Ces caractéristiques font de CCDC125 une cible pertinente pour des études mécanistiques reliant l’organisation subcellulaire aux phénotypes observés dans des contextes pathologiques liés à la prolifération et au stress.
CCDC125 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CCDC125 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CCDC125. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CCDC125. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CCDC125.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.