Nicht CRISPR-Daten: Das Bild veranschaulicht die Qualität von Antikörpern zur Visualisierung von CRISPR-Experimentergebnissen.
Nicht CRISPR-Daten: Das Bild veranschaulicht die Qualität von Antikörpern zur Visualisierung von CRISPR-Experimentergebnissen.
CB2/Cannabinoid Receptor 2/CNR2 Double Nickase Plasmid (h): sc-401054-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das CB2/Cannabinoid Receptor 2/CNR2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- CB2/Cannabinoid Receptor 2/CNR2 Double-Nickase-Plasmid (h) und CB2/Cannabinoid Receptor 2/CNR2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CNR2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: CB2/Cannabinoid Receptor 2/CNR2: sc-518269
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
CB2/Cannabinoid Receptor 2/CNR2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-401054-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CB2/Cannabinoid Receptor 2/CNR2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401054-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CNR2 kodiert den Cannabinoidrezeptor 2 (CB2), einen Gi/o-gekoppelten GPCR, der besonders in Immunzellen angereichert ist und die cAMP-Signalübertragung, die MAPK/ERK-Aktivierung sowie PI3K–AKT-Signalwege nachgeschaltet von Endocannabinoiden wie 2-AG und Anandamid moduliert. Die CB2-Signalgebung reguliert die Migration von Leukozyten, die Zytokinfreisetzung, die Funktion antigenpräsentierender Zellen und die Immunhomöostase und ist damit mit der Auflösung von Entzündungen und Reaktionen auf Gewebeschädigungen verknüpft. Veränderte CNR2-Aktivität und -Expression wurden bei verschiedenen autoimmunen und entzündlichen Erkrankungen, bei Neuroinflammation, Fibrose sowie in der tumorassoziierten Immunregulation beschrieben, was den Lokus für mechanistische Studien immunmodulatorischer Netzwerke besonders nützlich macht. CB2 greift zudem in Chemokin- und Toll-like-Rezeptor-Signalwege ein und beeinflusst zelluläre Polarisationszustände, die angeborene und adaptive Immunantworten prägen.
CB2/Cannabinoid Receptor 2/CNR2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CNR2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CNR2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CNR2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CNR2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.