Plasmide Double Nickase (h) caveolin-2: sc-402547-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) caveolin-2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide caveolin-2 Double Nickase (h) et le plasmide caveolin-2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CAV2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) caveolin-2 | sc-402547-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) caveolin-2 | sc-402547-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **CAV2** code la caveoline‑2, une protéine d’échafaudage membranaire intégrale, enrichie dans les cavéoles, qui contribue à organiser les microdomaines des radeaux lipidiques et à réguler la courbure membranaire, l’endocytose et l’homéostasie du cholestérol. La caveoline‑2 coopère avec la caveoline‑1 pour influencer l’assemblage des cavéoles et moduler des nœuds de signalisation tels que les récepteurs à activité tyrosine kinase, la signalisation eNOS/NO, ainsi que la dynamique des voies MAPK et PI3K/AKT en aval, de manière dépendante du type cellulaire. Par ses effets sur le trafic membranaire, l’adhésion et la mécanotransduction, **CAV2** a été associé à la biologie vasculaire et pulmonaire, à la régulation métabolique et à des états de signalisation altérés observés dans de multiples contextes pathologiques, y compris des phénotypes liés au cancer. En tant que marqueur et régulateur de la fonction cavéolaire, **CAV2** est fréquemment étudié dans les cellules endothéliales, les fibroblastes et les systèmes épithéliaux afin d’explorer la signalisation compartimentée et les réponses au stress dépendantes de la membrane.
caveolin-2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CAV2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CAV2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CAV2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CAV2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.