caveolin-2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-419480

Übersicht

Cav2 kodiert Caveolin‑2, eine integrale Membrankomponente der Caveolae, die mit Caveolin‑1 zusammenwirkt, um Einstülpungen der Plasmamembran zu formen und Lipid‑Raft‑Mikrodomänen zu organisieren. Caveolin‑2 beeinflusst Endozytose und Transzytose, Mechanotransduktion sowie die Signal‑Kompartimentierung in Signalwegen mit Rezeptor‑Tyrosinkinasen, eNOS/NO‑Signalgebung und Zytoskelett‑Remodellierung. In Mausgeweben ist die Cav2‑Expression besonders in Endothelzellen, Adipozyten und bestimmten epithelialen Kompartimenten ausgeprägt, wo sie zum Membrantransport und zur vaskulären Homöostase beiträgt. Eine dysregulierte Caveolae‑Biologie wird mit kardiopulmonalen und metabolischen Phänotypen sowie mit kontextabhängigen Effekten auf Zellmigration und ‑proliferation in Verbindung gebracht, wodurch Cav2 ein nützliches Ziel zur Untersuchung der Membranorganisation in krankheitsrelevanten Modellen darstellt.

Das caveolin-2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Cav2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Cav2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Cav2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die caveolin-2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Cav2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der caveolin-2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Cav2-Exone abzielen, die für die caveolin-2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Cav2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom caveolin-2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom caveolin-2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Cav2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das caveolin-2 HDR-Plasmid (m) und caveolin-2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Cav2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Cav2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.