Plasmide Double Nickase (h) CAT-2: sc-407551-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CAT-2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CAT-2 Double Nickase (h) et le plasmide CAT-2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SLC7A2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CAT-2 | sc-407551-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CAT-2 | sc-407551-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC7A2 code le transporteur d’acides aminés cationiques CAT-2, un transporteur de la membrane plasmique qui assure l’entrée, indépendante du sodium, de la L-arginine, de la L-lysine et de la L-ornithine. En contrôlant la disponibilité intracellulaire en arginine, CAT-2 influence la production de la NO synthase, la biosynthèse des polyamines, ainsi que des programmes plus larges de métabolisme de l’azote et des acides aminés qui façonnent l’activation cellulaire et les réponses au stress. L’activité de SLC7A2 est fréquemment étudiée dans des contextes de signalisation immunitaire et inflammatoire, où le flux de substrats peut moduler l’équilibre rédox et des phénotypes induits par les cytokines. Une régulation altérée des voies de transport de l’arginine a été associée à la biologie de maladies cardiométaboliques et inflammatoires, faisant de CAT-2 une cible utile pour des études mécanistiques des réseaux de signalisation dépendants de l’arginine.
CAT-2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SLC7A2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SLC7A2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SLC7A2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SLC7A2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.