Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) caspase-9: sc-400257-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) caspase-9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide caspase-9 Double Nickase (h) et le plasmide caspase-9 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CASP9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: caspase-9 Antibody (96.1.23): sc-56076
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) caspase-9 | sc-400257-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) caspase-9 | sc-400257-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CASP9 code la caspase-9, une caspase initiatrice qui active la cascade apoptotique intrinsèque (mitochondriale) en réponse au stress cellulaire et aux dommages de l'ADN. Après la libération du cytochrome c, la caspase-9 est recrutée au sein de l'apoptosome avec APAF1, ce qui entraîne l'activation protéolytique des caspases effectrices telles que CASP3 et CASP7 et un clivage étendu de leurs substrats. Cette voie s'entrecroise avec la régulation par la famille BCL2, les réponses au stress dépendantes de p53 et la perméabilisation de la membrane externe mitochondriale, orientant les décisions de destinée cellulaire et l'homéostasie tissulaire. Une signalisation CASP9 dérégulée a été impliquée dans la modification des seuils d'apoptose observée en oncologie, dans des mécanismes de neurodégénérescence et dans des phénotypes de survie des cellules immunitaires.
caspase-9 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CASP9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CASP9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CASP9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CASP9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.