Plasmide Double Nickase (h) caspase-4 p20: sc-400858-NIC

Le gène humain **CASP4** code la caspase-4, une caspase inflammatoire qui participe à la signalisation de l’immunité innée et à des cascades protéolytiques associées à la mort cellulaire pyroptotique. La caspase-4 est activée directement par le lipopolysaccharide cytosolique et favorise la signalisation de l’inflammasome non canonique, notamment le clivage de la gasdermine D et, en aval, la maturation des cytokines via des interactions entre inflammasomes. Cette voie s’articule avec les réponses au stress du réticulum endoplasmique et des programmes inflammatoires plus larges qui modulent l’homéostasie des cellules épithéliales et myéloïdes. Une activité dérégulée de CASP4 a été associée à des états inflammatoires exacerbés et a été étudiée dans des contextes tels que la physiopathologie du sepsis, l’inflammation intestinale et l’inflammation associée au cancer.

caspase-4 p20 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CASP4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CASP4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CASP4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CASP4.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.