Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
caspase-4 p20 Plasmide Double Nickase (h): sc-400858-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- caspase-4 p20 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il caspase-4 p20 Double Nickase Plasmid (h) e il caspase-4 p20 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira CASP4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: caspase-4 Antibody (4B9): sc-56056
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
caspase-4 p20 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400858-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
caspase-4 p20 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400858-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **CASP4** codifica la **caspasi-4**, una caspasi infiammatoria che partecipa alla segnalazione dell’immunità innata e a cascate proteolitiche collegate alla morte cellulare piroptotica. La caspasi-4 viene attivata direttamente dal lipopolisaccaride citosolico e promuove la segnalazione dell’inflammasoma non canonico, inclusi il clivaggio della gasdermina D e la maturazione a valle delle citochine attraverso il crosstalk tra inflammasomi. Questa via si integra con le risposte allo stress del reticolo endoplasmatico e con programmi infiammatori più ampi che modellano l’omeostasi delle cellule epiteliali e mieloidi. Un’attività deregolata di **CASP4** è stata associata a stati infiammatori accentuati ed è stata studiata in contesti quali la biologia della sepsi, l’infiammazione intestinale e l’infiammazione associata al cancro.
caspase-4 p20 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus CASP4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di CASP4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di CASP4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con CASP4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.