Plásmido Doble Nickase (h) caspase-2: sc-401079-NIC

CASP2 codifica la caspasa-2, una proteasa iniciadora de cisteína que integra señales de estrés celular para regular la apoptosis, los puntos de control del ciclo celular y la estabilidad genómica. La caspasa-2 participa en la señalización de muerte intrínseca y en vías sensibles al estrés, incluidas las respuestas asociadas a p53 frente al daño del ADN y el estrés oxidativo, y puede influir en la permeabilización de la membrana externa mitocondrial mediante el corte de efectores posteriores. Al vincular la detección del daño con la muerte celular programada y el control mitótico, CASP2 contribuye al mantenimiento de la homeostasis tisular y se ha estudiado en contextos de tumorogénesis, neurodegeneración y estrés inflamatorio. La actividad desregulada de CASP2 se ha asociado con una susceptibilidad alterada a la apoptosis y con una depuración deficiente de células dañadas, lo que la hace relevante para estudios mecanísticos de decisiones sobre el destino celular.

caspase-2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CASP2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CASP2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CASP2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CASP2 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.