Plasmide Double Nickase (h) casein kinase IIβ: sc-401684-NIC

CSNK2B code la sous-unité régulatrice bêta de la protéine kinase CK2, un complexe kinase sérine/thréonine constitutivement actif qui module la sélection des substrats, la stabilité et l’assemblage des sous-unités catalytiques. La signalisation de CK2 influence le contrôle, dépendant de la phosphorylation, de la progression du cycle cellulaire, des réponses aux dommages de l’ADN, de l’apoptose et de la maturation des ARN, en interfaçant avec des voies telles que NF-κB, Wnt/β-caténine et PI3K/AKT. Par une phosphorégulation étendue des facteurs de transcription et des protéines associées à la chromatine, CSNK2B contribue à l’adaptation au stress cellulaire et à la protéostasie. Une activité de CK2 dérégulée et une expression altérée de CSNK2B ont été associées à des programmes de signalisation oncogéniques et à des phénotypes neurodéveloppementaux, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques des réseaux de phosphorylation.

casein kinase IIβ Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CSNK2B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CSNK2B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CSNK2B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CSNK2B.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.