casein kinase IIα′ Double Nickase Plasmid (h): sc-401148-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das casein kinase IIα′ Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- casein kinase IIα′ Double-Nickase-Plasmid (h) und casein kinase IIα′ Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CSNK2A2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
casein kinase IIα′ Double Nickase Plasmid (h) | sc-401148-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
casein kinase IIα′ Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401148-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CSNK2A2 kodiert die katalytische Untereinheit Alpha′ der Casein-Kinase II, eine konstitutiv aktive Serin/Threonin-Kinase, die mit regulatorischen Beta-Untereinheiten zum CK2-Holoenzym zusammenwirkt. CK2 phosphoryliert ein breites Spektrum an Substraten, die an Zellzyklusprogression, DNA-Schadenssignalgebung, Chromatinregulation und Ribosomenbiogenese beteiligt sind, und greift in Signalwege wie Wnt/β‑Catenin, NF‑κB und PI3K/AKT ein, um Proliferation und Stressantworten fein abzustimmen. Über diese Funktionen trägt CSNK2A2 zur Aufrechterhaltung der Proteostase sowie zu Transkriptionsprogrammen bei, die in Krebs und anderen Erkrankungen mit veränderten Phosphorylierungsnetzwerken häufig fehlreguliert sind. Die gezielte Störung der CK2-Aktivität wird zudem eingesetzt, um die kinaseabhängige Kontrolle von Apoptose, Differenzierung und inflammatorischer Signalgebung in unterschiedlichen humanen Zellmodellen zu untersuchen.
casein kinase IIα′ Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CSNK2A2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CSNK2A2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CSNK2A2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CSNK2A2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.