Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
CARD 9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402214
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- CARD 9 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico CARD 9, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CARD 9 Anticuerpo (A-8): sc-374569
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
CARD 9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402214 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El miembro 9 de la familia con dominio de reclutamiento de caspasas (CARD9) es una proteína adaptadora expresada predominantemente en células mieloides que acopla los receptores de reconocimiento de patrones con la señalización inflamatoria aguas abajo. Funciona en el complejo CARD9–BCL10–MALT1 para promover la activación de las vías NF-κB y MAPK tras detectar componentes fúngicos y bacterianos mediante receptores de lectina tipo C como Dectin-1, modulando la producción de citocinas y la polarización de la inmunidad innata. CARD9 también influye en respuestas relacionadas con el inflamasoma y en la defensa del huésped en las barreras mucosas al coordinar programas efectores antimicrobianos. La variación genética o una señalización alterada de CARD9 se ha asociado con susceptibilidad a infecciones fúngicas invasivas y con fenotipos inflamatorios, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico en investigación inmunológica y centrada en el microbioma.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO CARD 9 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CARD9 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CARD9 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CARD9 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína CARD 9.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CARD9 para la investigación de la señalización de CARD 9, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CARD9 críticos para la función de CARD 9
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CARD9 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido CARD 9 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido CARD 9 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CARD9. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR CARD 9 (h) y el plásmido HDR CARD 9 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CARD9 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CARD9 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.