Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) CARD 11: sc-402770-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)CARD 11 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa CARD 11 (h) y el plásmido de doble nickasa CARD 11 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CARD11. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: CARD 11 Anticuerpo (A-4): sc-166910
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) CARD 11 | sc-402770-NIC | 20 µg | $410.00 |
El gen humano CARD11 (CARD11/CARMA1) codifica una proteína andamiaje que conecta la señalización del receptor de antígeno con la activación posterior de las vías de NF-κB, JNK y mTOR, integrando las señales necesarias para la activación, proliferación y producción de citocinas de los linfocitos. Tras la estimulación, CARD11 participa en el ensamblaje del complejo CBM (CARD11–BCL10–MALT1) para promover la activación de IKK y programas transcripcionales que controlan las respuestas inmunitarias. La desregulación de la señalización de CARD11 se asocia con alteraciones de la homeostasis inmunitaria, incluidas la inmunodeficiencia y fenotipos linfoproliferativos, y se observan perturbaciones recurrentes de esta vía en determinadas neoplasias malignas de células B y T. Como nodo central en la señalización proximal al receptor, CARD11 se estudia ampliamente por sus mecanismos de transducción de señales, regulación transcripcional y decisiones de destino de las células inmunitarias.
CARD 11 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CARD11 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CARD11. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CARD11. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CARD11 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.