Plasmide Double Nickase (h) CaMKII gamma: sc-400681-NIC

Le gène humain **CAMK2G** code **CaMKII gamma**, une kinase sérine/thréonine activée par le complexe **Ca2+/calmoduline**, qui convertit les transitoires de calcium en programmes de phosphorylation contrôlant la plasticité synaptique, le couplage excitation–transcription et le remodelage du cytosquelette. CaMKII gamma participe à la signalisation CaMK et aux voies transcriptionnelles en aval liées à **MAPK/ERK** et **CREB**, influençant la motilité cellulaire, le trafic vésiculaire et l’expression génique dépendante de l’activité. Des altérations de l’activité ou de l’expression de **CAMK2G** ont été associées à une dérégulation de la signalisation calcique impliquée dans des phénotypes neurologiques et des processus liés à l’excitabilité ; cette protéine est également étudiée dans des contextes de signalisation aberrante des voies de prolifération et de réponse au stress.

CaMKII gamma Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CAMK2G dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CAMK2G. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CAMK2G. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CAMK2G.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.