Plasmide Double Nickase (h) CaM III: sc-400953-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) CaM III correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CaM III Double Nickase (h) et le plasmide CaM III Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CALM3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) CaM III | sc-400953-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) CaM III | sc-400953-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **CALM3** code la **calmoduline III (CaM III)**, un capteur de Ca2+ exprimé de manière ubiquitaire, qui se lie à une grande diversité de cibles afin de convertir des signaux calciques transitoires en réponses cellulaires coordonnées. CaM III régule des processus clés, notamment la signalisation via les **CaMK** et la voie **calcineurine/NFAT**, le métabolisme des nucléotides cycliques et le contrôle de l’ouverture/fermeture des canaux ioniques, influençant ainsi le couplage excitation–contraction, l’activité synaptique, la sécrétion et la progression du cycle cellulaire. En modulant les programmes de phosphorylation et de transcription, les voies dépendantes de la calmoduline façonnent la fonction mitochondriale et les réponses au stress, et sont fréquemment étudiées dans les travaux sur l’arythmogénèse, les phénotypes neurodéveloppementaux et la signalisation proliférative. Une altération de l’homéostasie calcique et un dysfonctionnement du réseau de la calmoduline sont donc pertinents pour les modèles mécanistiques des maladies cardiovasculaires et neurologiques, ainsi que pour la cartographie des voies de signalisation dans divers types cellulaires.
CaM III Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CALM3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CALM3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CALM3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CALM3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.