Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
cadherin-19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401716
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- cadherin-19 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico cadherin-19, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:cadherin-19 Anticorpo (D-1): sc-376990
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
cadherin-19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401716 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CDH19 codifica a caderina-19, uma molécula de adesão célula–célula dependente de cálcio que contribui para a arquitetura dos tecidos e para a sinalização mediada por contato. Como membro da família das caderinas clássicas, a caderina-19 sustenta a organização das junções aderentes por meio de interações com cateninas e de sua ligação ao citoesqueleto de actina, influenciando processos como polaridade celular, migração e diferenciação. A expressão de CDH19 foi relatada em linhagens neurais e gliais, nas quais a adesão mediada por caderinas pode moldar o padrão do desenvolvimento e as interações celulares. A desregulação da expressão de caderinas e o remodelamento das junções estão frequentemente associados a alterações de invasividade e de identidade de linhagem em contextos de doença, tornando CDH19 um alvo útil para o estudo de fenótipos dependentes de adesão.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO cadherin-19 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CDH19 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CDH19, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CDH19 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína cadherin-19.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CDH19 para a investigação da sinalização de cadherin-19, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CDH19 críticos para a função cadherin-19
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CDH19 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo cadherin-19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo cadherin-19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CDH19. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo cadherin-19 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR cadherin-19 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CDH19 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CDH19 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.