Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) Cacna2d1: sc-402833-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Cacna2d1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Cacna2d1 Double Nickase (h) et le plasmide Cacna2d1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant CACNA2D1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Cacna2d1 Antibody (E-10): sc-271697
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Cacna2d1 | sc-402833-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Cacna2d1 | sc-402833-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CACNA2D1 code pour la sous-unité auxiliaire α2δ-1 des canaux calciques voltage‑dépendants, un régulateur clé du trafic des canaux, de la stabilité membranaire et du gating, qui façonne l’influx de calcium lors de l’excitabilité et du couplage stimulus–sécrétion. En modulant la fonction des canaux CaV, Cacna2d1 influence des cascades de signalisation dépendantes du calcium qui affectent la libération de neurotransmetteurs, la contraction musculaire et l’expression génique dépendante de l’activité. Une expression altérée de CACNA2D1 ou une régulation anormale du complexe canal a été associée à des perturbations de l’électrophysiologie et à des processus de remodelage pertinents dans des contextes de recherche neurologique et cardiovasculaire. En tant que composant du complexe canal exposé à la surface cellulaire, Cacna2d1 est également utile pour analyser comment les interactions extracellulaires et les modifications post‑traductionnelles ajustent la disponibilité des canaux calciques.
Cacna2d1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus CACNA2D1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de CACNA2D1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de CACNA2D1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de CACNA2D1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.