C6orf130 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-415131

Übersicht

OARD1 (C6orf130) ist ein menschliches proteinkodierendes Gen, dessen Funktion bislang nur begrenzt annotiert ist; die verfügbare Evidenz deutet jedoch auf Rollen bei der Regulation der zellulären Homöostase hin, vermittelt über Proteininteraktionen, die die Genexpression und stressresponsive Prozesse beeinflussen. Expressionsmuster und genetische Assoziationen haben diesen Lokus mit Signalwegen in Verbindung gebracht, die für neuronale Funktion und metabolische Regulation relevant sind, wobei eine veränderte Aktivität zu komplexen Krankheitsphänotypen beitragen kann. Als unvollständig charakterisierter Faktor wird C6orf130 häufig untersucht, um seine subzelluläre Lokalisation, Interaktionspartner sowie nachgeschaltete transkriptionelle oder Signaltransduktions-Effekte zu definieren. Loss-of-Function-Studien helfen zu klären, ob OARD1 Zellwachstum, Differenzierung oder adaptive Antworten auf proteotoxischen oder oxidativen Stress beeinflusst.

Das C6orf130 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des OARD1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des OARD1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von OARD1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die C6orf130-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von OARD1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der C6orf130-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf OARD1-Exone abzielen, die für die C6orf130-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere OARD1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom C6orf130 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom C6orf130 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des OARD1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das C6orf130 HDR-Plasmid (h) und C6orf130 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von OARD1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten OARD1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.