C23 (Nucleolin) Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400191-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- C23 (Nucleolin)O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase C23 (Nucleolin) (h) e o Plasmídeo Double Nickase C23 (Nucleolin) (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NCL. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:C23 Anticorpo (MS-3): sc-8031
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
C23 (Nucleolin) Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400191-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
C23 (Nucleolin) Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400191-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **NCL** codifica a **C23 (nucleolina)**, uma proteína nucleolar abundante de ligação a RNA que coordena a biogênese dos ribossomos por meio da transcrição de rDNA, do processamento do pré-rRNA e da montagem de ribonucleoproteínas. Para além do nucléolo, a nucleolina participa da estabilidade de mRNA, da organização da cromatina, das respostas a danos no DNA e do tráfego nucleocitoplasmático, conectando-a a vias que regulam o crescimento celular e a adaptação ao estresse. Alterações na expressão, na localização ou em modificações pós-traducionais de **NCL** têm sido associadas à proliferação desregulada, à manutenção genômica comprometida e a mudanças em programas de tradução observadas em múltiplos contextos de doença, incluindo câncer e neurodegeneração. Como um arcabouço multifuncional, a C23 é amplamente estudada por seus papéis na sinalização de estresse nucleolar e na regulação do metabolismo de RNA.
C23 (Nucleolin) O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NCL em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NCL. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NCL. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NCL interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.