Plasmide Double Nickase (h) C20orf111: sc-412210-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) C20orf111 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide C20orf111 Double Nickase (h) et le plasmide C20orf111 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant OSER1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) C20orf111 | sc-412210-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) C20orf111 | sc-412210-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
OSER1 (protéine C20orf111) est un facteur humain associé au réticulum endoplasmique (RE), impliqué dans l’organisation de l’architecture des membranes du RE et le maintien de l’homéostasie de la voie sécrétoire. Parmi les rôles cellulaires rapportés d’OSER1 figurent des contributions à la morphologie du RE, à la gestion des protéines au sein du système sécrétoire précoce, ainsi qu’à la coordination de processus d’adaptation au stress en interface avec les réseaux de protéostasie. Les altérations de la structure du RE et la signalisation chronique de stress du RE sont largement pertinentes pour le remodelage oncogénique et les mécanismes neurodégénératifs, ce qui fait d’OSER1 un nœud utile pour étudier comment l’organisation membranaire influence l’état cellulaire. L’expression d’OSER1 et son contexte de voie ont été étudiés en lien avec des phénotypes de prolifération et de réponse au stress, ce qui soutient son inclusion dans des études de génomique fonctionnelle portant sur le remodelage cellulaire associé aux maladies.
C20orf111 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus OSER1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de OSER1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de OSER1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de OSER1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.