Plasmide Double Nickase (h) C1r: sc-405842-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) C1r correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide C1r Double Nickase (h) et le plasmide C1r Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant C1R. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: C1r Antibody (F-7): sc-514105
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) C1r | sc-405842-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) C1r | sc-405842-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C1R code pour la protéase à sérine C1r du complément, qui s’associe à C1q et C1s pour former le complexe C1 et initier la cascade du complément par la voie classique. Lorsqu’elle est activée, C1r clive et active C1s, entraînant ensuite le clivage de C4 et de C2 et favorisant l’opsonisation ainsi que la signalisation inflammatoire. La fonction de C1r fait le lien entre la surveillance immunitaire innée, l’élimination des complexes immuns et la modulation des réseaux de cytokines. Une activité dysrégulée de C1R et un déséquilibre de la voie classique ont été associés à des phénotypes inflammatoires médiés par le complément et à des lésions tissulaires liées aux complexes immuns, ce qui étaye son intérêt en tant que cible mécanistique en recherche en immunologie.
C1r Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus C1R dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de C1R. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de C1R. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de C1R.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.