Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide Double Nickase (h) C1INH: sc-403065-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) C1INH correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide C1INH Double Nickase (h) et le plasmide C1INH Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SERPING1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: C1INH Antibody (B-11): sc-377062
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) C1INH | sc-403065-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) C1INH | sc-403065-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SERPING1 code l’inhibiteur de la C1 estérase (C1INH), une serpine sécrétée qui inhibe de façon irréversible plusieurs sérine-protéases des voies du complément et de l’activation de contact, notamment C1r/C1s, MASP-1/2, la kallikréine plasmatique et le facteur XIIa. En limitant l’activation du complément par les voies classique et des lectines, ainsi que la génération de bradykinine, C1INH contribue au maintien de l’homéostasie vasculaire et empêche une amplification inflammatoire inappropriée. Une altération de la fonction de SERPING1 perturbe la signalisation du complément et des kinines, ce qui est étroitement lié à des troubles caractérisés par une activité des protéases plasmatiques dérégulée, une perméabilité vasculaire accrue et des phénotypes d’œdème inflammatoire.
C1INH Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SERPING1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SERPING1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SERPING1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SERPING1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.