Plasmide Double Nickase (h) C15orf42: sc-409351-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Treslin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Treslin Double Nickase (h) et le plasmide Treslin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TICRR. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) C15orf42 | sc-409351-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Treslin | sc-409351-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TICRR, également connu sous le nom de C15orf42, code un facteur d’initiation de la réplication qui couple la signalisation des kinases de la phase S au déclenchement des origines de réplication de l’ADN. La protéine favorise l’assemblage et l’activation de la machinerie de réplication via des interactions avec des facteurs clés de la réplication, contribuant à coordonner la synthèse de l’ADN en temps voulu avec le contrôle des points de contrôle. En tant que composant des réseaux de maintenance du génome, la fonction de TICRR recoupe les réponses médiées par ATR/CHK1 au stress réplicatif et contribue au maintien de la stabilité chromosomique. La dérégulation de l’initiation de la réplication et de la signalisation des checkpoints liée à une perturbation de TICRR est pertinente pour les études des états prolifératifs, des réponses aux dommages de l’ADN et de la biologie des maladies associées à l’instabilité génomique.
Treslin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TICRR dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TICRR. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TICRR. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TICRR.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.