Plasmide Double Nickase (h) C14orf119: sc-412417-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) C14orf119 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide C14orf119 Double Nickase (h) et le plasmide C14orf119 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant C14orf119. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) C14orf119 | sc-412417-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) C14orf119 | sc-412417-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C14orf119 (humain) code une protéine encore mal caractérisée, avec une annotation fonctionnelle limitée et une cartographie des voies peu fournie dans les ressources de référence actuellement disponibles. Les données existantes au niveau des transcrits et des protéines suggèrent qu’elle pourrait contribuer à des processus cellulaires fondamentaux tels que la régulation de l’expression génique, la localisation des protéines ou une signalisation dépendante du contexte, mais ses partenaires moléculaires spécifiques et son rôle mécanistique restent à définir. Des profils d’expression et des analyses comparatives peuvent être utilisés pour explorer d’éventuels liens avec des transitions d’état cellulaire, des réponses au stress ou des programmes propres à certaines lignées. En tant que cadre de lecture ouvert peu étudié, C14orf119 présente un intérêt pour les approches de génomique fonctionnelle visant à relier génotype et phénotype dans des contextes associés aux maladies, sans présupposer l’existence d’une voie définie.
C14orf119 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus C14orf119 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de C14orf119. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de C14orf119. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de C14orf119.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.