C12orf34 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-408987

Übersicht

FAM222A kodiert das menschliche Protein C12orf34, einen bislang nur unzureichend charakterisierten Faktor mit zunehmend erkennbaren Zusammenhängen zur zellulären Homöostase und stressantwortlichen Signalwegen. Verfügbare transkriptomische und proteomische Datensätze deuten auf eine kontextabhängige Expression sowie eine mögliche Beteiligung an intrazellulärem Transport und Proteostase-Netzwerken hin, die mit entzündungsassoziierten Signalwegen verknüpft sind. Eine veränderte FAM222A/C12orf34-Expression wurde in krankheitsassoziierten molekularen Profilen berichtet, darunter Datensätze zu Neurodegeneration und Krebs, was weitere Untersuchungen seiner regulatorischen Funktionen unterstützt. Loss-of-Function-Modelle sind hilfreich, um zu klären, wie C12orf34 zum Crosstalk zwischen Signalwegen beiträgt, der Zellüberleben, Signalbalance und gewebespezifische Phänotypen beeinflusst.

Das C12orf34 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des FAM222A-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des FAM222A-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von FAM222A nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die C12orf34-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von FAM222A-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der C12orf34-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf FAM222A-Exone abzielen, die für die C12orf34-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere FAM222A-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom C12orf34 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom C12orf34 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des FAM222A-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das C12orf34 HDR-Plasmid (h) und C12orf34 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von FAM222A-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten FAM222A-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.