Plasmide Double Nickase (h) c-IAP2: sc-400762-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) c-IAP2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide c-IAP2 Double Nickase (h) et le plasmide c-IAP2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BIRC3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: c-IAP2 Antibody (Ac-71): sc-517317
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) c-IAP2 | sc-400762-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) c-IAP2 | sc-400762-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BIRC3 code l’inhibiteur cellulaire humain de l’apoptose 2 (c-IAP2), une ligase E3 de l’ubiquitine qui régule la signalisation de la superfamille des récepteurs du TNF en ubiquitinylant RIPK1 et des adaptateurs apparentés, afin d’ajuster l’activation de NF‑κB, les réponses inflammatoires et les décisions de mort cellulaire. Grâce à ses domaines BIR et à son doigt RING, c‑IAP2 intègre un contrôle dépendant de l’ubiquitine de l’apoptose et de la nécroptose, modulant l’activité des caspases et la signalisation de survie en réponse aux cytokines et au stress. Une fonction ou une expression dérégulée de BIRC3 est associée à une signalisation immunitaire altérée et à une résistance à l’apoptose, et des perturbations récurrentes de cette voie sont rapportées dans les hémopathies malignes et d’autres cancers. En tant que nœud des réseaux ubiquitine‑protéasome et TNF/NF‑κB, BIRC3 est fréquemment étudié dans le cadre de travaux sur la signalisation inflammatoire, les points de contrôle de la survie cellulaire et le remodelage des voies médié par l’ubiquitine.
c-IAP2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BIRC3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BIRC3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BIRC3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BIRC3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.