Plasmide Double Nickase (m) C/EBP beta: sc-419623-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) C/EBP beta correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide C/EBP beta Double Nickase (m) et le plasmide C/EBP beta Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Cebpb. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: C/EBP beta Antibody (H-7): sc-7962
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) C/EBP beta | sc-419623-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) C/EBP beta | sc-419623-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Cebpb** code **C/EBP bêta**, un facteur de transcription de type *basic leucine zipper* (bZIP) qui coordonne des programmes d’expression génique inductibles en réponse à des signaux inflammatoires, au stress métabolique et à des signaux de différenciation. C/EBP bêta intègre des entrées provenant des voies des cytokines et des récepteurs de type Toll (TLR) et coopère avec des facteurs tels que NF-κB et les STAT pour réguler l’engagement de la lignée myéloïde, les réponses de phase aiguë et l’adipogenèse. Son activité influence le contrôle du cycle cellulaire, la survie et le remodelage tissulaire via la régulation transcriptionnelle de réseaux de gènes immunitaires et métaboliques. Une signalisation de C/EBP bêta dérégulée est fréquemment étudiée dans des contextes d’inflammation chronique, de dysfonction métabolique et de reprogrammation transcriptionnelle oncogénique dans des modèles mammifères.
C/EBP beta Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Cebpb dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Cebpb. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Cebpb. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Cebpb.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.