Plasmide Double Nickase (h2) BTNL9: sc-414736-NIC-2
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h2) BTNL9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide BTNL9 Double Nickase (h2) et le plasmide BTNL9 Double Nickase (h22) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BTNL9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h2) BTNL9 | sc-414736-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain BTNL9 (butyrophilin-like 9) code un membre de la superfamille des immunoglobulines impliqué dans la régulation de la communication des cellules immunitaires aux interfaces épithéliales et muqueuses, avec des rôles proposés dans la modulation des réponses des lymphocytes T et des lymphocytes de type inné via des mécanismes de co‑régulation apparentés aux butyrophilines. Les profils d’expression de BTNL9 suggèrent une participation à la surveillance immunitaire, au maintien de l’homéostasie des barrières et aux voies de signalisation inflammatoires qui façonnent les milieux locaux en cytokines et les états d’activation induits par l’antigène. Des études génétiques et transcriptomiques ont associé une activité altérée de BTNL9 à des troubles à médiation immunitaire et à des modifications du microenvironnement immunitaire liées au cancer, ce qui étaye son utilisation comme levier moléculaire pour étudier l’immunorégulation dans des contextes pathologiques. L’édition du gène BTNL9 dans des modèles cellulaires humains permet de disséquer fonctionnellement la signalisation de la famille BTNL, d’évaluer ses effets sur l’activation lymphocytaire et le dialogue épithélio‑immunitaire, et de valider, dans des approches mécanistiques, les variants associés à BTNL9.
BTNL9 Le plasmide double nickase (h2) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BTNL9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BTNL9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BTNL9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BTNL9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.