Plasmide Double Nickase (h) BTG1: sc-405339-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) BTG1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide BTG1 Double Nickase (h) et le plasmide BTG1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BTG1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: BTG1 Antibody (2095C1a): sc-81207
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) BTG1 | sc-405339-NIC | 20 µg | $410.00 |
BTG1 (B-cell translocation gene 1) code une protéine antiproliférative de la famille TOB/BTG, qui module la progression du cycle cellulaire, la différenciation et l’apoptose via des mécanismes de contrôle transcriptionnels et post-transcriptionnels. BTG1 participe à des voies régulant la deadénylation et le renouvellement des ARNm grâce à des interactions avec des composants du complexe CCR4–NOT, et peut influencer des programmes transcriptionnels liés à la quiescence cellulaire et aux réponses au stress. Dans les contextes immunitaire et hématopoïétique, BTG1 contribue à façonner le développement des lymphocytes et leurs états d’activation, et une expression altérée de BTG1 ou sa perturbation a été associée à une prolifération dérégulée. Des lésions génétiques impliquant BTG1 ont été rapportées dans plusieurs types de malignités lymphoïdes, ce qui confirme sa pertinence pour l’étude de la stabilité du génome, des signalisations oncogéniques et du contrôle de la croissance spécifique de certaines lignées.
BTG1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BTG1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BTG1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BTG1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BTG1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.