Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
BTBD4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-428253
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- BTBD4 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico BTBD4, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: BTBD4 Anticuerpo (C-5): sc-390260
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
BTBD4 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-428253 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Zbtb46 codifica la proteína BTBD4, un factor que contiene un dominio BTB/POZ e implicado en programas de regulación transcripcional que moldean la identidad celular y los estados de diferenciación en tejidos de ratón. En inmunobiología, la expresión de Zbtb46 se utiliza ampliamente como marcador del linaje de células dendríticas clásicas, y su actividad reguladora se estudia en el contexto de la presentación de antígenos, la señalización inflamatoria y la vigilancia inmunitaria homeostática. Se han examinado redes génicas asociadas a Zbtb46 alteradas en modelos de inmunidad asociada a tumores y de enfermedad inflamatoria, donde cambios en la función de las células dendríticas pueden influir en los perfiles de citocinas y en el cebado de células T. Como resultado, la perturbación de Zbtb46/BTBD4 es un enfoque útil para diseccionar circuitos transcripcionales que conectan la diferenciación, las vías inmunitarias innatas y las respuestas al microambiente.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO BTBD4 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Zbtb46 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Zbtb46 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Zbtb46 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BTBD4.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Zbtb46 para la investigación de la señalización de BTBD4, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Zbtb46 críticos para la función de BTBD4
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Zbtb46 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido BTBD4 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido BTBD4 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Zbtb46. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BTBD4 (m) y el plásmido HDR BTBD4 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Zbtb46 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Zbtb46 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.