Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Brm Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-426415-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- BrmO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Brm (m) e o Plasmídeo Double Nickase Brm (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Smarca2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Brm Anticorpo (E-1): sc-17828
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Brm Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-426415-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Brm Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-426415-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Smarca2 de camundongo codifica Brm (SMARCA2), uma subunidade helicase dependente de ATP do complexo de remodelamento de cromatina SWI/SNF (BAF), que reposiciona nucleossomos para regular programas de transcrição. Brm ajuda a coordenar a acessibilidade de enhancers e promotores em vias que controlam a progressão do ciclo celular, a especificação de linhagem, as respostas a danos no DNA e a diferenciação. A atividade alterada do SWI/SNF, incluindo a perturbação da função de SMARCA2/BRM ou da composição do complexo, está ligada à desregulação epigenética observada em diversos contextos relevantes para doenças, como a biologia do câncer e processos do neurodesenvolvimento. Assim, Smarca2 é amplamente estudado por seu papel na arquitetura da cromatina, na cooperatividade de fatores de transcrição e na estabilidade do genoma em células de mamíferos.
Brm O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Smarca2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Smarca2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Smarca2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Smarca2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.