BRD1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406252

Übersicht

Humanes BRD1 (Bromodomänen-enthaltend 1) ist ein chromatinassoziierter Regulator, der über seine Bromodomäne acetylierte Lysinreste an Histonschwänzen erkennt und damit Histonacetylierung mit der transkriptionellen Kontrolle verknüpft. BRD1 ist an epigenetischen Programmen beteiligt, die die Genexpression während der Entwicklung und zellulären Differenzierung prägen, einschließlich der Regulation von Promotor- und Enhancer-Aktivität durch Chromatin-Remodelling und die Rekrutierung von Koregulatoren. Indem BRD1 Transkriptionsnetzwerke moduliert, die mit neuronalen und immunbezogenen Signalwegen verknüpft sind, wurde es im Kontext veränderter Genexpressionszustände untersucht, die für neuropsychiatrische und andere komplexe, polygen bedingte Erkrankungen relevant sind. Seine Rolle an der Schnittstelle von Histonacetylierung und Transkription macht BRD1 zu einem nützlichen Ziel, um chromatindependente Mechanismen zu untersuchen, die Zellidentität und Stressantworten beeinflussen.

Das BRD1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des BRD1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des BRD1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von BRD1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die BRD1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von BRD1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der BRD1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf BRD1-Exone abzielen, die für die BRD1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere BRD1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom BRD1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom BRD1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des BRD1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das BRD1 HDR-Plasmid (h) und BRD1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von BRD1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten BRD1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.