Plasmide Double Nickase (m) BRCA2: sc-419363-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) BRCA2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide BRCA2 Double Nickase (m) et le plasmide BRCA2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Brca2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) BRCA2 | sc-419363-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) BRCA2 | sc-419363-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin *Brca2* code BRCA2, un médiateur central de la recombinaison homologue qui favorise l’assemblage des filaments de RAD51 et régit la réparation à haute fidélité des cassures double brin de l’ADN. BRCA2 coordonne la protection et la reprise des fourches de réplication, contribuant à prévenir l’instabilité génomique induite par le stress réplicatif pendant la phase S. Par ses rôles dans la signalisation de la réponse aux dommages de l’ADN et dans les processus de réparation associés à la chromatine, BRCA2 assure une ségrégation correcte des chromosomes et limite l’accumulation de réarrangements délétères. L’altération de la fonction de BRCA2 est largement utilisée comme modèle de réparation dirigée par l’homologie défectueuse, de sensibilité modifiée aux agents génotoxiques et de processus mutagènes liés à la biologie de la prédisposition au cancer.
BRCA2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Brca2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Brca2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Brca2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Brca2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.