Plásmido Doble Nickase (h) bradykinin B2 R: sc-401771-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)bradykinin B2 R consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa bradykinin B2 R (h) y el plásmido de doble nickasa bradykinin B2 R (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a BDKRB2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) bradykinin B2 R | sc-401771-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) bradykinin B2 R | sc-401771-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BDKRB2 codifica el receptor B2 de bradicinina (bradykinin B2 R), un receptor acoplado a proteína G expresado de forma constitutiva que media las respuestas a cininas como la bradicinina y la calidina. Tras la unión del ligando, señala principalmente a través de Gq/11 para estimular la fosfolipasa C, la movilización de Ca²⁺ intracelular y la señalización posterior relacionada con PKC, MAPK/ERK y óxido nítrico, que regulan la permeabilidad endotelial, la vasodilatación, el tono del músculo liso y las respuestas inflamatorias. La actividad de BDKRB2 se cruza con la interacción entre el sistema calicreína–cininas y el sistema renina–angiotensina, influyendo en la homeostasis vascular y la remodelación tisular. La desregulación de la señalización de BDKRB2 se ha implicado en fenotipos inflamatorios y cardiovasculares, procesos relacionados con el edema, la sensibilización al dolor y la señalización del microambiente asociada al cáncer, lo que respalda su uso en estudios mecanísticos de la biología de los GPCR y la inflamación vascular.
bradykinin B2 R El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus BDKRB2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de BDKRB2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de BDKRB2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con BDKRB2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.