Bex1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-422657

Übersicht

BEX1 (brain expressed X-linked 1) kodiert ein kleines intrazelluläres Protein, das in neuronalen Geweben angereichert ist und mit neuronaler Differenzierung, Axonleitung und Zellzykluskontrolle in Verbindung gebracht wird. BEX1 ist an Signalnetzwerken beteiligt, die mit Neurotrophin-/NGF-Antworten verknüpft sind, und kann Transkriptionsprogramme modulieren, indem es mit regulatorischen Proteinen interagiert, die Überlebens- und Stresssignalwege beeinflussen. Im sich entwickelnden und im adulten Nervensystem wurde eine veränderte BEX1-Expression mit Änderungen des Neuritenauswuchses und der neuronalen Erhaltung assoziiert, was seine Relevanz für die neuroentwicklungs- und neurodegenerationsbezogene Forschung unterstreicht. Eine Fehlregulation von BEX1 wurde zudem in mehreren krebsbezogenen Expressionsdatensätzen beschrieben, in denen sie in Modellsystemen der Tumorbiologie mit Proliferations- und Apoptose-Phänotypen in Zusammenhang gebracht wurde.

Das Bex1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Bex1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Bex1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Bex1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Bex1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Bex1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Bex1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Bex1-Exone abzielen, die für die Bex1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Bex1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Bex1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Bex1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Bex1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Bex1 HDR-Plasmid (m) und Bex1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Bex1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Bex1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.