Plasmide Double Nickase (h) beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β₂-AR: sc-400291-NIC

ADRB2 code le récepteur β2‑adrénergique humain (β2‑AR), un récepteur couplé aux protéines G qui détecte les catécholamines et s’associe principalement à Gs pour augmenter l’AMPc et activer une signalisation dépendante de la PKA. En régulant l’activité de l’adénylate cyclase, la désensibilisation du récepteur via les GRK et les β‑arrestines, ainsi que des programmes transcriptionnels en aval, ADRB2 influence le tonus du muscle lisse, le métabolisme des muscles cardiaque et squelettique, et la signalisation des cellules immunitaires. Le β2‑AR engage également des processus d’internalisation et de trafic du récepteur qui modulent la durée et la polarisation du signal, en s’intégrant, selon le contexte, à des voies liées aux MAPK et au calcium. Une signalisation ou une expression dérégulée d’ADRB2 a été étudiée dans l’asthme et l’hyperréactivité des voies aériennes, la physiologie cardiovasculaire, des phénotypes métaboliques et la modulation neuro‑immune associée au stress, ce qui en fait une cible largement utilisée pour la recherche en voies de signalisation et en pharmacologie.

beta 2 Adrenergic Receptor/ADRB2/β2-AR Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ADRB2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ADRB2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ADRB2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ADRB2.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.