Plasmide Double Nickase (h) Bcr: sc-401514-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Bcr correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Bcr Double Nickase (h) et le plasmide Bcr Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BCR. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Bcr Antibody (B-12): sc-28375
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Bcr | sc-401514-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Bcr | sc-401514-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BCR code pour Bcr, une protéine multidomaine dotée d’activités de kinase sérine/thréonine et de régulation des GTPases de la famille Rho, qui coordonne le remodelage du cytosquelette et la signalisation intracellulaire. Bcr agit comme protéine activatrice de GTPase (GAP) pour RAC1 et d’autres petites GTPases apparentées, reliant des signaux en amont à la dynamique de l’actine, à l’adhérence et aux programmes de motilité cellulaire. Elle contribue également à des réseaux de signalisation qui modulent la prolifération et les réponses au stress via des interactions avec des voies dépendantes de la phosphorylation. Une altération de la fonction de BCR est biologiquement pertinente dans le contexte des maladies hématologiques, notamment via des événements de fusion oncogéniques qui dérégulent la signalisation des tyrosine kinases et les programmes transcriptionnels en aval.
Bcr Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BCR dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BCR. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BCR. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BCR.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.