Plasmide Double Nickase (h) Bcl-9: sc-404408-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Bcl-9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Bcl-9 Double Nickase (h) et le plasmide Bcl-9 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BCL9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Bcl-9 Antibody (2071C3a): sc-81199
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Bcl-9 | sc-404408-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Bcl-9 | sc-404408-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BCL9 code pour Bcl-9, un coactivateur transcriptionnel qui relie la β-caténine aux facteurs de liaison à l’ADN TCF/LEF afin de réguler l’expression des gènes dépendante de la voie Wnt/β-caténine. Par cette interaction, Bcl-9 influence des programmes contrôlant la prolifération cellulaire, la spécification des lignages et l’homéostasie tissulaire, et contribue à l’assemblage de complexes transcriptionnels au niveau des enhancers sensibles à Wnt. Une activité dérégulée de BCL9 est fréquemment associée aux sorties anormales de signalisation Wnt observées dans de nombreux cancers, où un contrôle transcriptionnel altéré peut favoriser la progression tumorale et l’invasivité. Par conséquent, BCL9 est largement étudié comme un nœud reliant l’activation amont de la voie Wnt à des réseaux transcriptionnels oncogéniques en aval.
Bcl-9 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BCL9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BCL9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BCL9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BCL9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.