Plasmide Double Nickase (h) Bcl-3: sc-400740-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Bcl-3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Bcl-3 Double Nickase (h) et le plasmide Bcl-3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BCL3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Bcl-3 Antibody (150-3.5): sc-32741
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Bcl-3 | sc-400740-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Bcl-3 | sc-400740-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BCL3 code pour Bcl-3, un membre atypique de la famille IκB qui se localise dans le noyau et module la transcription en se liant aux homodimères NF-κB p50/p52. Par cette interaction, Bcl-3 peut agir, selon le contexte, comme coactivateur ou corépresseur, façonnant des programmes d’expression liés à l’inflammation, au contrôle du cycle cellulaire et aux voies de signalisation de survie. L’activité de BCL3 croise les voies NF-κB, les voies induites par les cytokines et la régulation transcriptionnelle associée à la chromatine, influençant la fonction des cellules immunitaires et les réponses au stress. Une expression ou une signalisation de BCL3 dérégulée a été associée à des programmes transcriptionnels oncogéniques et à des états inflammatoires altérés, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques en biologie du cancer et en immunologie.
Bcl-3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BCL3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BCL3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BCL3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BCL3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.