Plasmide Double Nickase (h) BCDO2: sc-413515-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) BCDO2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide BCDO2 Double Nickase (h) et le plasmide BCDO2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant BCO2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) BCDO2 | sc-413515-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) BCDO2 | sc-413515-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
BCO2 code la β-carotène 9′,10′-oxygénase 2 (BCDO2), une enzyme mitochondriale de clivage des caroténoïdes qui catalyse le clivage oxydatif des caroténoïdes en apocaroténoïdes, régulant ainsi les niveaux intracellulaires de caroténoïdes et la signalisation en aval liée aux rétinoïdes. En contrôlant le renouvellement des caroténoïdes, BCDO2 influence l’équilibre rédox mitochondrial et peut moduler les réponses au stress oxydatif associées au métabolisme lipidique et à l’homéostasie cellulaire. Une activité altérée de BCO2 a été associée à des variations interindividuelles du métabolisme des caroténoïdes et a été étudiée dans le contexte de traits métaboliques et de phénotypes cellulaires liés au stress oxydatif. Ces caractéristiques font de BCO2 une cible utile pour étudier, dans des cellules humaines, le métabolisme mitochondrial, la gestion des espèces réactives de l’oxygène et des programmes transcriptionnels dépendants des apocaroténoïdes.
BCDO2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus BCO2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de BCO2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de BCO2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de BCO2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.