Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) Bax: sc-419292-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Bax correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Bax Double Nickase (m) et le plasmide Bax Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Bax. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Bax Antibody (B-9): sc-7480
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Bax | sc-419292-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène Bax de la souris code BAX, un effecteur pro-apoptotique de la famille BCL-2 qui contrôle la perméabilisation de la membrane externe mitochondriale et l’engagement dans l’apoptose intrinsèque. En réponse à un stress cellulaire, BAX subit une activation conformationnelle et s’oligomérise au niveau des mitochondries, favorisant la libération du cytochrome c, la formation de l’apoptosome et l’activation de la cascade des caspases. L’activité de BAX s’intègre aux voies de signalisation de p53, aux régulateurs BH3-only et à des voies de survie telles que PI3K–AKT, qui ajustent le seuil apoptotique. Une mort cellulaire dépendante de Bax dérégulée est pertinente dans l’étude de la tumorigenèse, de la neurodégénérescence et des lésions tissulaires, où une apoptose mitochondriale altérée influence le destin cellulaire et les réponses au stress.
Bax Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Bax dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Bax. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Bax. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Bax.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.