Plasmide CRISPR/Cas9 KO BANP (h): sc-412401

Présentation

BANP (protéine nucléaire associée à BTG3), également connue sous le nom de SMAR1, est un facteur nucléaire se liant à l’ADN, impliqué dans l’organisation de la chromatine et le contrôle de la transcription au niveau des régions d’attachement à la matrice. Elle a été associée à la régulation de la progression du cycle cellulaire, des réponses aux points de contrôle, ainsi qu’au maintien de la stabilité du génome via la coordination de programmes transcriptionnels et de processus liés aux dommages à l’ADN. L’activité de BANP s’articule avec le remodelage de la chromatine et des réseaux de signalisation associés aux suppresseurs de tumeurs, influençant la prolifération et l’expression génique induite par le stress. Une dysrégulation de l’expression ou de la fonction de BANP a été associée à des altérations du contrôle de la croissance et de l’intégrité du génome, pertinentes pour la biologie du cancer et des modèles cellulaires apparentés.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO BANP (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène BANP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du BANP, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert BANP à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine BANP.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en BANP pour l'étude de la signalisation de BANP, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de BANP essentiels à la fonction de BANP
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de BANP pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le BANP plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le BANP plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus BANP. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le BANP plasmide HDR (h) et le BANP (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie BANP pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles BANP définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.