Plasmide Double Nickase (h) BAF53B: sc-409940-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) BAF53B correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide BAF53B Double Nickase (h) et le plasmide BAF53B Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ACTL6B. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) BAF53B | sc-409940-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) BAF53B | sc-409940-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **ACTL6B** code **BAF53B**, une sous-unité apparentée à l’actine des complexes de remodelage de la chromatine **SWI/SNF (BAF)** dépendants de l’ATP, enrichis dans les neurones, qui régulent le positionnement des nucléosomes et les programmes transcriptionnels au cours du neurodéveloppement. BAF53B contribue à l’expression génique dépendante de l’activité, à la différenciation neuronale et à la plasticité synaptique en coordonnant l’accessibilité de la chromatine avec l’occupation des facteurs de transcription. Par son rôle dans l’assemblage et le ciblage du complexe BAF, ACTL6B relie la régulation épigénétique aux voies qui contrôlent la maturation neuronale et la formation des circuits. La dérégulation des composants du complexe BAF et du remodelage de la chromatine neuronale est impliquée dans les mécanismes des maladies neurodéveloppementales et neuropsychiatriques, faisant d’ACTL6B un locus pertinent pour étudier les relations gène–chromatine dans des modèles adaptés au cerveau.
BAF53B Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ACTL6B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ACTL6B. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ACTL6B. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ACTL6B.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.