Plasmide Double Nickase (m) BAF155: sc-423028-NIC

Le gène murin **Smarcc1** code **BAF155 (SMARCC1)**, une sous-unité d’échafaudage centrale du complexe de remodelage de la chromatine **SWI/SNF (BAF)**, dépendant de l’ATP, qui régule le positionnement des nucléosomes et l’accessibilité de la chromatine. BAF155 coordonne l’assemblage et la stabilité des complexes BAF afin de contrôler des programmes transcriptionnels liés à la spécification des lignages, au contrôle du cycle cellulaire et aux réponses aux dommages de l’ADN. Grâce à ses interactions avec des facteurs de transcription et des régulateurs de la chromatine, BAF155 influence l’activité des enhancers et l’expression de gènes associés à la différenciation dans de multiples tissus. Les altérations de la fonction des sous-unités SWI/SNF sont largement impliquées en oncologie et dans des phénotypes neurodéveloppementaux, ce qui fait de **Smarcc1** une cible clé pour des études mécanistiques de la régulation épigénétique.

BAF155 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Smarcc1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Smarcc1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Smarcc1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Smarcc1.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.