Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO BACE (h2): sc-401500-KO-2
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- BACE Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h2) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique BACE, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: BACE Antibody (61-3E7): sc-33711
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO BACE (h2) | sc-401500-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
BACE1 code l’enzyme 1 de clivage de la protéine précurseur de l’amyloïde au site β (BACE), une protéase aspartique qui initie le traitement amyloïdogène d’APP en générant l’extrémité N-terminale des peptides Aβ. Cette activité s’inscrit dans le trafic endosomal et la protéostasie lysosomale, où des compartiments acides favorisent la maturation de BACE et le clivage de ses substrats. Le traitement dépendant de BACE1 influence la fonction synaptique et la signalisation neuronale en modulant les niveaux de fragments dérivés d’APP et d’autres substrats neuronaux. Une expression ou une activité dérégulée de BACE1 a été associée à la pathologie moléculaire liée à la maladie d’Alzheimer et fait fréquemment l’objet d’études dans le contexte de la biologie de la voie amyloïde et des mécanismes de neurodégénérescence.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO BACE (h2) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène BACE1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du BACE1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert BACE1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine BACE.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en BACE1 pour l'étude de la signalisation de BACE, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de BACE1 essentiels à la fonction de BACE
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de BACE1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le BACE plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le BACE plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus BACE1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le BACE plasmide HDR (h) et le BACE (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie BACE1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles BACE1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.