Plasmide Double Nickase (h) B7-H4: sc-416865-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) B7-H4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide B7-H4 Double Nickase (h) et le plasmide B7-H4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant VTCN1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) B7-H4 | sc-416865-NIC | 20 µg | $410.00 |
VTCN1 code pour B7-H4 (V-set domain-containing T-cell activation inhibitor 1), une molécule de point de contrôle immunitaire de la famille B7 qui inhibe la prolifération des lymphocytes T et la production de cytokines, contribuant ainsi à façonner la tolérance immunitaire périphérique. B7-H4 est généralement faiblement exprimée dans la plupart des tissus normaux, mais peut être induite sur les cellules présentatrices d’antigènes et dans divers contextes épithéliaux, ce qui relie sa régulation aux signaux inflammatoires et aux interactions tumeur–système immunitaire. En modulant la signalisation co‑stimulatrice et les voies en aval qui influencent l’état d’activation des lymphocytes T, B7-H4 participe à des mécanismes d’échappement immunitaire et est fréquemment étudiée en oncologie et dans des modèles de maladies inflammatoires chroniques. Une expression altérée de VTCN1/B7-H4 est associée à des changements de l’infiltration immunitaire et à des microenvironnements immunosuppresseurs, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques de la régulation immune.
B7-H4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus VTCN1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de VTCN1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de VTCN1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de VTCN1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.