ATRX Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400454-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ATRXO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ATRX (h) e o Plasmídeo Double Nickase ATRX (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ATRX. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ATRX Anticorpo (D-5): sc-55584
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ATRX Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400454-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ATRX Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400454-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATRX codifica um remodelador de cromatina dependente de ATP do tipo SWI/SNF, que atua em parceria com a DAXX para depositar a variante de histona H3.3 em regiões genômicas repetitivas, incluindo telômeros e heterocromatina pericentromérica. Por meio da regulação do posicionamento de nucleossomos, do timing de replicação do DNA e de programas transcricionais, ATRX ajuda a manter a estabilidade do genoma e a arquitetura adequada da cromatina. A disfunção de ATRX está associada a estados epigenéticos alterados e a vias de manutenção dos telômeros, sendo frequentemente estudada em contextos como transtornos do neurodesenvolvimento e cânceres que exibem alongamento alternativo de telômeros (ALT). Como fator nuclear de cromatina, ATRX é comumente investigado por seus papéis nas respostas a danos no DNA, na tolerância ao estresse replicativo e no controle da expressão de elementos repetitivos.
ATRX O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ATRX em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ATRX. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ATRX. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ATRX interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.